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自适应制备柱分离性能测试的步骤

  自适应制备柱由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前处理就显得非常的必要。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到,而且价格低廉,但玻璃柱子致命的弱点是它能承受的压力很小,且非常容易破碎。当由于压力太小而导致流动相流速很慢的时候,高位液面或加高压空气(或者氮气)的采用是一个简单的解决办法。在底下加真空,也能在一定程度上解决这个问题。

  自适应制备柱分离性能测试的步骤:

  ①考虑到填料由分析级直接放大到制备级的因素,如果要纯化大量的化合物,需要考虑分析柱的规格和可作为制备柱的填料粒径(10mm或更大);作为在下一步纯化产品量更大的项目,必须考虑选择更大的填料粒径和更大内径的色谱柱,在与分析柱相同的填料下对产品进行纯化。

  ②对分析柱(4.6mm内径或更小)选择性的研究,应在多种填料和多种色谱条件下进行选择,可以采用一些商品的液相色谱条件选择软件进行多种色谱模式的比较选择,这样可以缩短分离条件选择的时间。

  ③在得到分离条件后,需要对分析柱上样品的承载量进行测试,比较多种上样量下产物的纯度,选择产物纯度的上样量。

  ④选择制备柱的规格,要依据在分析柱上得到的上样量数据,进行放大分离,通常选择与分析柱相同粒径的填料和色谱柱长度来达到推测制备分离的预测。放大制备柱的上样量应基于制备柱和分析柱的交叉截面面积的比值来进行选择。

  ⑤检查制备色谱分离的结果和色谱馏出物的区域以及纯度。


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